高压灭菌锅在微生物试验中的操作指导

高压灭菌锅中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
我们要知道，灭菌温度应是一个温度范围，而不是一个固定值。通常高压蒸汽灭菌温度是一个固定值，如试管斜面培养基和摇瓶液体培养基的灭菌要求为：121℃，20min，但在121℃只是灭菌温度的下限，实际的灭菌温度在121℃-124℃（或123℃）之间波动。如果是自动控温型灭菌锅，设定好灭菌温度下限为121℃后，当温度升到124℃（或123℃）时，自动断电停止加热，当温度降到121℃时，自动开始加热；如果是手动控温型灭菌锅，当温度升到124℃时，手动切断电源停止加热，当温度降到121℃时，手动接通电源开始加热。
高压灭菌锅在微生物试验中的操作说明：
1.首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
2.放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
3.加盖并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
4.用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。
5.灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让高压灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。
6.将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。

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